e:Med - Modul II - Verbundprojekt: Melanoma sensitivity - Validierung des prädiktiven SYSACT Modells zur TRAIL/APG und Trametinib/Dabrafenib Kombinationsterapie beim malignen Melanom unter Verwendung eines organotypischen 3D Sphäroid-Modells - Teilprojekt A

Anhand eines organotypischen humanen 3D Melanom-Sphäroid-Modells soll das prädiktive Potential von SYSACT unter in vivo nahen 3D Bedingungen validiert werden. In Kombination mit qualitativer Netzwerkanalyse sollen die Voraussetzungen für eine individualisierte präklinische Therapeutika-Testung optimiert werden. Das eigens entwickelte humane, organotypische Vollhautmodell, das Melanom-Sphäroide in definierter Anzahl und Größe enthält, kann eine Zelldifferenzierung analog zu kutanen humanen Metastasen abbilden. Dieses Modell soll durch Integration von primärem Patienten-Tumormaterial als präklinisches Testsystem weiterentwickelt werden, als Basis für die Testung von APG350/Zytostatika als auch zielgerichteter mutationsspezifischer Therapeutika unter in vivo nahen Bedingungen dienen, um SYSACT auf 3D Ebene zu validieren und für gezielte Melanomtherapeutika weiter zu entwickeln. Die Standardisierung dieses Modells bietet optimale Voraussetzungen um systembiologische Signalweganalysen in die klinische Anwendung zu transferieren. SYSACT soll anhand von 3D organotypischen Sphäroid-Vollhautmodellen validiert und unter Verwendung von BRAF-wt und BRAF-mut Melanomzelllinien auf die Kombinationstherapien mit therapeutisch aktiven single-chain TRAIL (APG350) und den spezifischen Inhibitoren Dabrafenib (BRAF) und Tramatenib (MEK) erweitert werden. Dazu werden quantitative Proteindaten erhoben und im SYSACT Modell ausgewertet. Ergänzt werden die spezifischen Parameter durch die Erkenntnisse aus einer qualitativen Netzwerkanalyse und Transkriptomdaten-Validierungen. Schließlich sollen die Ergebnisse mit aus Patientenmaterial gewonnenen Tumorsphäroiden präklinisch validiert werden.