ERA-NET EuroTransBio-10: Light-Up-Digitale Amplifikation auf Basis der LAMP-Technologie für die Point-of-Care Anwendung

Entwicklung einer zentrifugalen Mikrofluidik zur automatisierten digitalen Amplifikation von HIV- und HTLV-Erregern auf Basis der LAMP. Mit der LAMP-Technik sind sehr schnelle Ergebnisse möglich (teils < 30 min), da die Reaktion bei geeigneten Bedingungen direkt aus dem Blut ohne RNA-Extraktion durchgeführt werden kann. Im digitalen Reaktionsprinzip werden die Erreger in kleinsten Tröpfchen vereinzelt, so dass in jedem nur 1 oder 0 RNA-Stränge vorliegen. Diese RNA-Moleküle werden dann mittels LAMP amplifiziert und das Ergebnis gemessen. Die Schlüsseltechnologie ist eine integrierte Struktur zur Bildung der o.g. Tröpfchen, in denen die LAMP-Reaktion abläuft. Im Projekt sollen Methoden zur Reduzierung der Spritzgusskosten erzielt werden. Das erforderliche Gerätesystem basiert auf bekannten Bauteilen, die für die spezielle digitale LAMP neu zusammengestellt werden. AP 1: Erstellen des Lasten- und Pflichtenhefts mit Projektzielvereinbarung; Risikoanalyse AP 2 Assay: Primer- und Reaktionspufferentwicklung; Mediator-Probe-Nachweis für HIV-1, HIV-2, HTLV-1. AP 3 Mikrofluidik: Probenaufnahmesystem, Layout mikrofluidischer Kammern / Kanäle, Entwicklung des Spritzguss-Kunststoffpolymergemischs AP 4 Gerät: Festlegung technischer Funktionsanforderungen; Auswahl der Optik; Motorsteuerung, Programmierung: Eingabesystems, Datenauswertung und -übertragung. AP 5 Systemintegration: "RUN"-Protokoll der digtalen LAMP-Mikrofluidik; Integration aller Einzelkomponenten auf das Gerätesystem; erste Tests der kompletten Prozesskette WP 6 Validierung: Erstellen des Validierungspanels für die Erprobungsphase, Vergleichsanalyse zu anderen Systemen, Ergebnisauswertung; Projektabschlussbericht.