ERA-Net: Verbundprojekt: Alphavirus-basierte Chitinase-ähnliche Protein exprimierende Vektoren für Anti-Tumor Programmierung von Makrophagen; Teilprojekt: Ruprecht-Karls-Universität Heidelberg

Ein essentieller Faktor des Mikromillieus eines Tumors stellen Tumor-assoziierte Makrophagen (TAM) dar. Der fortschrittlichste Ansatz die tumoriziden Fähigkeiten von TAM im Kampf gegen den Tumor einzusetzen ist eine funktionelle Reprogrammierung. Um dies zu erreichen soll das CLP (chitinase-like protein) genutzt werden, welches in einem präklinischen Tiermodell im Stande war die Tumor-unterstützenden Eigenschaften von TAM zu hemmen. In AlphaChit Projekt soll die therapeutische Effizienz von Alphaviren überprüft werden, welche CLP durch ihren natürlichen Tumortropismus in das kanzerogene Gewebe einbringen sollen. Die Fähigkeit dieser CLP Vektoren, TAM zu Reprogrammieren und die Tumorprogression zu hemmen, wird in präklinischen Modellsystemen in vivo und ex vivo untersucht. Das Ziel von Alpha-Chit ist ein innovativer Ansatz der Gentherapie, welcher die anti-Tumor Eigenschaften von TAM nutzbar macht. Die Herstellung von alphaviralen CLP Konstrukten mit effizienter Synthese und Sekretion von CLP in vitro bildet die Ausgangsbasis des Projektes. Die Effizienz der alphaviralen CLP Expression wird in einem murinen Brustkrebsmodell bestimmt. Die Auswertung erfolgt mittels IHC (Immunhistochemie) in subkutan transplantierten TS/A Tumoren. Ein detailliertes Protokoll für die Gabe von alphaviralem CLP wird erstellt. Der Mechanismus von pro-inflammatorischem, alphaviralem CLP wird einem in vitro Modell für humanen Makrophagen untersucht. Hierbei werden M1 und M2 Makrophagen mit Alphaviren infiziert und der Effekt mittels Analyse der Expression von M1 und M2 Markern, der Sekretion von Zytokinen, der Aktivität bestimmter Signalwege, und transkriptioneller Veränderungen bestimmt. Der therapeutische Nutzen der Reprogrammierung von TAM zu anti-Tumor Makrophagen durch alphavirales CLP wird in einem ex vivo Modell für humane TAM untersucht. Hierbei sollen zwei Vektoren mit dem größten therapeutischen Nutzen für eine klinische Studie identifiziert werden.